Proċess ta 'Purifikazzjoni Downstream Ta' Vaċċin tad-Dijarea tal-Ħnieżer

Id-dijarea hija waħda mit-tliet mardiet ewlenin li kkawżaw telf ekonomiku kbir lill-industrija tal-ħnieżer fiċ-Ċina. Hemm ħafna fatturi li jikkawżaw dijarea fil-ħnieżer, u l-fatturi virali huma l-aktar serji. Ħnieżer ta 'kull età jistgħu jiġu infettati, speċjalment ħnieżer li jreddgħu, u r-rata ta' mortalità wara l-infezzjoni tista 'tilħaq aktar minn 50%. Il-virus tad-dijarea epidemika tal-ħnieżer (PEDV) u l-virus tal-gastroenterite Trasmissibbli tal-ħnieżer (TGEV) huma mifruxa fid-dinja, u ż-żewġ virus jistgħu jiġu infettati waħedhom jew flimkien. Bħalissa, m'hemm l-ebda mediċina speċifika biex tikkura PEDV u TGEV, u l-prevenzjoni u l-kontroll tad-dijarea tal-ħnieżer huma prinċipalment vaċċini kummerċjali.

Vaċċini tradizzjonali tad-dijarea epidemika tal-ħnieżer jinkludu prinċipalment vaċċin sħiħ inattivat tal-virus u vaċċin ħaj attenwat. Klinikament, vaċċin inattivat tandem PEDV u TGEV jew vaċċin attenwat, u vaċċin inattivat triplu PEDV, TGEV u rotavirus tal-ħnieżer (RV) jew vaċċin attenwat huma komunement użati, l-aktar vaċċin tandem PEDV u TGEV.

Fil-preżent, hemm ħafna vaċċini kontra d-dijarea epidemika tal-ħnieżer fiċ-Ċina.

Il-proċess ta 'produzzjoni ta' vaċċini inattivati ​​u attenwati huwa simili, prinċipalment inklużi ħames passi ta 'kultura ta' patoġenu, inattivazzjoni ta 'patoġenu jew attenwat, estrazzjoni u purifikazzjoni ta' patoġenu, preparazzjoni u ippakkjar ta 'vaċċini, u kontroll tal-kwalità tal-vaċċin. Dan l-artikolu prinċipalment jintroduċi l-proċedura ta 'purifikazzjoni tal-patoġenu.

Kjarifika

L-iskop tal-kjarifika huwa li tiżgura t-tneħħija ta 'debris taċ-ċelluli u aggregati oħra ta' partiċelli kbar. Fil-produzzjoni tal-kultura taċ-ċelluli ta 'varjetà ta' velenu, minbarra li jkun fih numru kbir ta 'partiċelli tal-virus, hemm ħafna debris tat-tessut taċ-ċelluli u prodotti metaboliċi u impuritajiet oħra, li jagħmlu l-velenu fl-istat ta' mċajpra jew semi-sħab, id-diretta użu ta ' din l-operazzjoni ta ' konċentrazzjoni tal-velenu dalwaqt se tagħmel il-membrana ultrafiltrazzjoni imblukkata, u ma jistax tlesti l-konċentrazzjoni tal-velenu, u li jirriżulta fl-ruttam tal-membrana ultrafiltrazzjoni. Għalhekk, qabel ma l-velenu jiġi kkonċentrat, l-ewwel irid jiġi ċċarat, li normalment isir permezz ta 'ċentrifugazzjoni b'veloċità baxxa u filtrazzjoni tal-membrana. Għandu jiġi nnutat li meta tuża t-teknoloġija tas-separazzjoni tal-membrana, minħabba l-materjal tal-membrana ħafna drabi jkun b'gruppi elettronegattivi jew idrofobiċi, huwa meħtieġ li jiġi investigat jekk il-materjal tal-membrana għandux adsorbiment għall-partiċelli tal-virus.

Pass ta 'kjarifika effiċjenti jeħtieġ taħlita ta' kapaċità għolja ta 'tneħħija ta' partiċelli solidi u rendiment għoli tal-prodott, amplifikazzjoni faċli, u protezzjoni ta 'unitajiet operattivi downstream aktar tard. Fil-preżent, filtru fond huwa użat għall-operazzjoni ta ' kjarifika.

 

Madankollu, meta l-iskala tal-kultivazzjoni tkun kbira wisq, ikun meħtieġ numru kbir ta 'membrani tal-filtri fil-fond, li jirriżulta f'żieda sostanzjali fl-ispiża tal-konsumabbli. Fl-istess ħin, id-densità għolja tal-kultura taċ-ċelluli se tnaqqas it-tagħbija tal-membrana tal-filtru fond, li tirriżulta fi spejjeż miżjuda u dilwizzjoni eċċessiva tal-prodott.

Il-metodu ta 'mikrofiltrazzjoni prinċipalment juża apparat ta' filtrazzjoni tanġenzjali tal-fluss, u l-komponenti tal-membrana huma cassstte tal-membrana ċatta u fibra vojta. Il-filtrazzjoni tanġenzjali tal-fluss (TFF) hija mmexxija mid-differenza tal-pressjoni transmembrana. Sustanzi u impuritajiet iżgħar mid-daqs tal-pori tal-membrana jgħaddu mill-membrana, filwaqt li impuritajiet bħal ċelloli b'partiċelli akbar huma maqbuda. Id-daqs tal-pori tal-membrana użata għall-mikrofiltrazzjoni huwa {{0}}.45/0.22μm. Il-mikrofiltrazzjoni tal-fluss tanġenzjali tal-fibra vojta tista 'tipproċessa direttament likwidu ta' kontenut solidu għoli, bħal mezz ta 'kultura taċ-ċelluli ta' densità għolja, tista 'telimina passi ta' ċentrifugazzjoni u prefiltrazzjoni b'inqas passi u tħaddim sempliċi, membrana tista 'tintuża ripetutament permezz ta' tindif, tnaqqis ta 'investiment ta' tagħmir u tħaddim spejjeż, f'konformità mar-rekwiżiti tal-produzzjoni awtomatizzata modulari.

 

Konċentrazzjoni u purifikazzjoni

Wara kjarifika preliminari, il-mezz tal-kultura tal-virus għadu fih numru kbir ta 'impuritajiet, inklużi partiċelli difettużi, qoxra virali, ċitotossina, medju, serum u frammenti taċ-ċelluli, eċċ Jekk dawn l-impuritajiet jiġu injettati fl-annimali, mhux biss jaffettwaw l-effikaċja ta' il-vaċċin, iżda wkoll jikkawża rispons immuni qawwi tal-ospitanti, u saħansitra jwassal għall-mewt tal-annimali mlaqqma. Għalhekk, il-konċentrazzjoni u l-purifikazzjoni huma meħtieġa biex jitneħħew impuritajiet bħal eteroproteini u frammenti taċ-ċelluli, itejbu u jinduċu risponsi immuni effettivi, inaqqsu l-ammont ta 'vaċċin użat, u jnaqqsu reazzjonijiet avversi.

Il-prinċipju tal-purifikazzjoni tal-virus: biex tinżamm l-attività bijoloġika u l-infettività tal-virus bħala l-premessa, biex tneħħi l-impuritajiet tal-virus u tiġi estratta l-purità għolja tal-virus.

Fil-preżent, il-metodi ewlenin ta 'konċentrazzjoni u purifikazzjoni użati fil-produzzjoni fuq skala kbira huma l-ultrafiltrazzjoni.

 

Metodu ta 'ultrafiltrazzjoni, prinċipalment juża apparat ta' ultrafiltrazzjoni tanġenzjali tal-fluss, sistema ta 'filtrazzjoni ta' fibra vojta u tagħmir ieħor ta 'filtrazzjoni, f'ċirkostanzi normali, l-applikazzjoni tal-metodu ta' ultrafiltrazzjoni tista 'tagħmel il-virus jikkonċentra aktar minn 100 darba, ir-rata ta' tneħħija ta 'eteroproteina sa 99%. Fost dawn, it-teknoloġija tal-filtrazzjoni tal-membrana tal-fibra vojta għandha l-vantaġġi ta 'shear force ħafifa u baxxa, plagg faċli, tħaddim flessibbli, ħajja twila u prezz baxx, u amplifikazzjoni faċli, għalhekk huwa rakkomandat li tagħżel fibra vojta għall-konċentrazzjoni u purifikazzjoni tal-virus.

Meta jintuża l-metodu ta 'ultrafiltrazzjoni għall-konċentrazzjoni u l-purifikazzjoni, huwa importanti ħafna li tagħżel id-daqs tal-pori tal-membrana xieraq, li jiddetermina direttament l-effiċjenza u l-kwalità tal-konċentrazzjoni. Min-naħa waħda, huwa meħtieġ li tagħżel l-apertura tal-membrana biex tinqabad b'mod effettiv il-molekuli fil-mira biex tiżgura r-rendiment, u min-naħa l-oħra, l-effett tat-tneħħija u l-veloċità tal-ipproċessar tal-eteroproteini għandhom jitqiesu bis-sħiħ. Għalhekk, l-aħjar prinċipju huwa li tagħżel il-membrana bl-akbar daqs tal-pori li tista 'tinqabad il-molekula fil-mira, u tipprova tagħżel il-membrana tal-filtru b'distribuzzjoni uniformi tad-daqs tal-pori.

Il-virus tad-dijarea Epidemika tal-Ħnieżer (PEDV) u l-virus tal-gastroenterite trasmissibbli (TGEV) huma t-tnejn koronavirus, li huma sferi polimorfiċi, bi spikes rasu 'l isfel bħal spik, li jvarjaw fid-dijametru minn 60 sa 190nm. Il-marda tar-rotavirus hija marda żoonotika li fiha r-rotavirus (RV) għandu dehra ta 'rota u huwa ta' madwar 70nm fid-dijametru. Dawn it-tliet virus ġeneralment jistgħu jiġu interċettati bl-użu ta' membrani ta' ultrafiltrazzjoni b'apertura 100-750kd.

 

Guidling Technology hija intrapriża nazzjonali ta 'teknoloġija għolja li tiffoka fuq bijofarmaċewtiċi, kultura taċ-ċelluli, purifikazzjoni u konċentrazzjoni ta' bijomediċina, dijanjosi u fluwidi industrijali. Aħna żviluppajna b'suċċess apparati ta 'filtru ċentrifugali, kasetts ta' ultrafiltrazzjoni u mikrofiltrazzjoni, filtru tal-virus, sistema TFF, filtru tal-fond, fibra vojta, eċċ Li jissodisfaw bis-sħiħ ix-xenarji ta 'applikazzjoni ta' bijofarmaċewtiċi, kultura taċ-ċelluli, eċċ. Il-membrani u l-filtri tal-membrana tagħna jintużaw ħafna f'konċentrazzjoni, estrazzjoni u separazzjoni ta 'prefiltrazzjoni, mikrofiltrazzjoni, ultrafiltrazzjoni u nanofiltrazzjoni. Il-ħafna linji ta 'prodotti tagħna, minn filtrazzjoni żgħira tal-laboratorju li tintuża darba għal sistemi ta' filtrazzjoni ta 'produzzjoni, ittestjar ta' sterilità, fermentazzjoni, kultura taċ-ċelluli u aktar, jissodisfaw il-ħtiġijiet tal-ittestjar u l-produzzjoni. Guidling Technology qed jistenna bil-ħerqa li jikkopera miegħek!