Proċess Effiċjenti U Bi prezz baxx għall-Kjarifika U Ultrafiltrazzjoni ta' Proteini rikombinanti li jesprimu l-ħmira

L-espressjoni tal-ħmira ta 'ġeni eżoġeni tista' mhux biss tipproduċi proteini u peptidi rikombinanti, antikorpi u vaċċini, ċitokini, fatturi ta 'tkabbir, ormoni u sustanzi bijoattivi oħra, iżda wkoll tista' tintuża biex tipproduċi enzimi industrijali, ikel funzjonali u materjali bijoloġiċi, li għandha prospetti wiesgħa ta 'applikazzjoni .

 

Is-sistema ta 'espressjoni tal-ħmira tinkludi żewġ sistemi ta' espressjoni użati komunement, jiġifieri, sistema ta 'espressjoni ta' saccharomyces cerevisiae u sistema ta 'espressjoni ta' ħmira metanotrofika. Is-sistema ta 'espressjoni tal-ħmira tal-metanol hija s-sistema ta' espressjoni tal-ħmira l-aktar użata fil-preżent, u Pichia hija l-aktar użata komunement, li tista 'tuża l-metanol bħala karbonju u enerġija. Barra minn hekk, hemm il-ħmira ta 'Hansen, Sphaeroides u l-bqija.

 

Ma jimpurtax f'liema tip ta 'sistema ta' espressjoni tal-ħmira, il-proċessi ta 'separazzjoni u purifikazzjoni downstream tagħha huma simili, u l-fluss tal-proċess speċifiku jieħu l-espressjoni tal-ħmira ta' proteini rikombinanti u mediċini polipeptidi bħala eżempju.

 

Il-cassettes tal-membrana tal-mikrofiltrazzjoni ta 'Guidling jadotta kanal ta' fluss miftuħ u modalità ta 'filtrazzjoni tanġenzjali tal-fluss, li jista' jipproċessa b'mod effettiv likwidu tal-għalf kumpless bħal likwidu tal-fermentazzjoni tal-ħmira u likwidu tal-qsim tal-E. coli b'veloċità għolja, u jista 'jiżgura amplifikazzjoni lineari minn test żgħir għal skala ta' produzzjoni. Disinn modulari kompatt, konnessjoni sempliċi tal-pipeline, indipendenza u leġibilità tas-sistema jistgħu jipproteġu lill-operaturi u jipprevjenu t-tniġġis bijoloġiku. U l-ebda verifika ta 'manutenzjoni u tindif. Għalhekk, huwa adattat ħafna għall-pass ta 'kjarifika ta' proċessar downstream bikri.

 

L-għan ewlieni tal-proċess UF/DF huwa li jitneħħew l-impuritajiet u jċaqalqu l-buffers. Il-cassette tal-membrana tal-ultrafiltrazzjoni ta 'Guidling għandha omoġeneità tajba tad-daqs tal-pori tal-membrana u idrofiliċità qawwija, li tista' tagħti lill-membrana fluss ogħla u assorbiment ta 'proteini aktar baxx, u disinn tal-kanal tal-fluss ottimizzat, bi tnaqqis fil-pressjoni iżgħar, trasferiment ta' materjal faċli u tqassar b'mod sinifikanti l-ħin tal-filtrazzjoni. Barra minn hekk, is-serje tal-prodott hija kompluta u flessibbli biex tissodisfa l-ħtiġijiet ta 'diversi applikazzjonijiet ta' skali differenti. Għalhekk, huwa adattat ħafna għall-pass UF/DF tal-ipproċessar downstream.

 

Dan li ġej huwa l-każ ta 'applikazzjoni tal-membrana Guidlingkasettfl-espressjoni tal-ħmira ta 'proteini rikombinanti.

 

Kjarifika tal-mikrofiltrazzjoni

Aħna użajna {{0}}.11 metru kwadru 0.22μm cassette tal-membrana tal-pori biex niċċaraw likwidu tal-fermentazzjoni tal-ħmira 1.5L (piż molekulari tal-proteina fil-mira 42-55 KD) permezz ta 'mikrofiltrazzjoni. Fil-proċess kollu tal-mikrofiltrazzjoni, ġew investigati r-rata ta 'rkupru tal-proteina fil-mira, il-bidla tat-turbidità u t-tnaqqis tal-fluss tal-membrana.

0-17min huwa l-proċess ta' konċentrazzjoni, 17-32min huwa l-proċess tal-ħasil u l-filtrazzjoni. Matul il-proċess kollu ta 'mikrofiltrazzjoni, TMP żdied gradwalment, il-veloċità tad-dħul tal-likwidu baqgħet ma nbidlitx, u l-fluss medju tal-materjal kien 45LMH.

It-turbidità tal-likwidu kienet 600NTU qabel il-mikrofiltrazzjoni u 8NTU wara l-mikrofiltrazzjoni, u t-turbidità inbidlet ovvjament.

Ir-riżultati wrew li r-rendiment tal-proteina fil-mira kien > 90%. Guidling Technology 0.22μm cassette tal-membrana hija stabbli u adattata għal dan ix-xenarju ta 'applikazzjoni.

 

Konċentrazzjoni ta 'ultrafiltrazzjoni

 

 

Ir-riżultati wrew li l-proteina fil-mira kienet kompletament maqbuda. Il-cassettes tal-membrana Guidling Technology 10kd jistgħu jaħdmu b'mod stabbli u huma adattati għal dan ix-xenarju ta 'applikazzjoni.

Ħafna mill-proteini rikombinanti espressi mill-ħmira ma kinux espressi ħafna. It-turbidità tal-likwidu filtrat kienet ovvjament imnaqqsa u r-rata ta 'rkupru tal-proteini kienet ogħla. Minħabba li l-ħin kromatografiku sussegwenti huwa twil wisq, se jikkawża effetti ħżiena fuq il-proteina, sabiex jitqassar il-ħin tal-kampjunar kromatografiku, jista 'jiġi miżjud pass wieħed ta' konċentrazzjoni ta 'ultrafiltrazzjoni, u l-proteina fil-mira tista' tiġi kkonċentrata malajr wara l-kampjun, li jista 'jkun tikseb l-iskop li tiffranka l-ħin, tnaqqas il-volum tal-mili u b'hekk tnaqqas l-ispiża tal-produzzjoni.

 

Il-cassettes tal-membrana tal-mikrofiltrazzjoni ta 'Guidling Technology ġeneralment jistgħu jnaqqsu t-turbidità tal-likwidu tal-għalf għal inqas minn 20NTU, u jissodisfaw bis-sħiħ il-ħtiġijiet ta' ultrafiltrazzjoni u kromatografija sussegwenti. Ir-rata ta 'rkupru ta' ultrafiltrazzjoni ta 'cassettes tal-membrana ta' ultrafiltrazzjoni se tvarja minħabba materjali differenti, ir-rata ta 'rkupru ġenerali tista' tilħaq 90-95%.

Guidling Technology tilqa'lek titlob kits tat-test għal evalwazzjoni relatata.

 

Dwar Guidling

Guidling Technology hija intrapriża nazzjonali ta 'teknoloġija għolja li tiffoka fuq bijofarmaċewtiċi, kultura taċ-ċelluli, purifikazzjoni u konċentrazzjoni ta' bijomediċina, dijanjosi u fluwidi industrijali. Aħna żviluppajna b'suċċess apparati ta 'filtru ċentrifugali, kasetts ta' ultrafiltrazzjoni u mikrofiltrazzjoni, filtru tal-virus, sistema TFF, filtru tal-fond, fibra vojta, eċċ Li jissodisfaw bis-sħiħ ix-xenarji ta 'applikazzjoni ta' bijofarmaċewtiċi, kultura taċ-ċelluli, eċċ. Il-membrani u l-filtri tal-membrana tagħna jintużaw ħafna f'konċentrazzjoni, estrazzjoni u separazzjoni ta 'prefiltrazzjoni, mikrofiltrazzjoni, ultrafiltrazzjoni u nanofiltrazzjoni. Il-ħafna linji ta 'prodotti tagħna, minn filtrazzjoni żgħira tal-laboratorju li tintuża darba għal sistemi ta' filtrazzjoni ta 'produzzjoni, ittestjar ta' sterilità, fermentazzjoni, kultura taċ-ċelluli u aktar, jissodisfaw il-ħtiġijiet tal-ittestjar u l-produzzjoni. Guidling Technology qed jistenna bil-ħerqa li jikkopera miegħek!