Tweġibiet għal Mistoqsijiet Professjonali Ta 'Pajp Ċentrifugali Ultrafiltrazzjoni
1. X'inhu l-materjal tal-membrana tat-tubu tal-ultrafiltrazzjoni?
Il-membrana tal-polyethersulfone għandha interċettazzjoni ta 'piż molekulari ċar u preċiż, proprjetajiet fiżiċi u kimiċi stabbli, assorbiment estremament baxx ta' proteina u rkupru għoli tal-prodott
2. Jekk proteini b'piżijiet molekulari differenti jeħtieġ li jiġu separati, kemm għandha bżonn differenza l-piż molekulari tal-proteini?
Iż-żewġ proteini jeħtieġ li jkunu 10 darbiet jew aktar differenti fid-daqs
3. Jistgħu jintużaw tubu ċentrifugali ta 'ultrafiltrazzjoni għall-konċentrazzjoni tal-virus?
Tubu ċentrifuga ultrafiltrazzjoni jistgħu jikkonċentraw il-virus ħafna drabi jew saħansitra żminijiet għoljin. Għandna membrana speċjali għall-virus. Viruses differenti jeħtieġ li jagħżlu d-daqs xieraq tal-pori tal-membrana
4. Jistgħu tubu ċentrifugali ultrafiltrationu jiġu diżinfettati u reżistenti għall-alkali?
Jista ' jiġi diżinfettat b' soluzzjoni milwiema ta ' 75% ethanol. Il-materjal tagħna jista 'jiflaħ ħasil alkalin ta' l-idrossidu tas-sodju 0.1-0.5n
5. Jistgħu ultrafiltrazzjoni tubu ċentrifugali jintużaw għall-isterilizzazzjoni bi pressjoni għolja
Għandna tubu speċjali ċentrifuga ultrafiltrazzjoni adattat għall-isterilizzazzjoni bi pressjoni għolja
6. Meta wieħed iqis l-istabbiltà tal-proteina, it-tubu tal-ultrafiltrazzjoni jista 'jiġi ċentrifugat f'temperatura baxxa?
Iva, il-materjal tagħna huwa reżistenti għal temperatura baxxa, iżda l-ħin tal-konċentrazzjoni se jkun itwal. Il-veloċità tal-filtrazzjoni tal-membrana hija relatata mat-temperatura likwida tal-għalf
7. Dwar ir-rata ta 'rkupru
Ġeneralment, ir-rata ta 'rkupru ta' soluti b'konċentrazzjoni akbar minn 0.1mg / ml hija 90% jew aktar. Ġeneralment, it-telf ta 'kampjuni huwa kkawżat minn adsorbiment mhux speċifiku fuq il-wiċċ tal-membrana tal-filtru u l-wiċċ tal-pajp tal-materjal. Sabiex tinkiseb rata għolja ta 'rkupru, il-piż molekulari miżmum tal-membrana tal-filtru magħżula huwa ta' madwar 1 / 3 tal-proteina fil-mira, il-membrana tal-ultrafiltrazzjoni hija membrana asimmetrika, id-daqs tal-pori tagħha huwa normalment imqassam, u jista 'jnixxi taħt pressjoni għolja ċentrifugali. Taħt din il-kundizzjoni, il-likwidu tal-proteina jista 'jiġi deformat, Għalhekk, iktar ma tkun żgħira l-apertura tal-interċettazzjoni, iktar tkun bil-mod ir-rata tal-fluss, iżda r-rata ta' rkupru tkun ogħla
8. Meta l-proteina tkun ikkonċentrata, hemm preċipitazzjoni. Kif tittrattaha?
Jekk il-proteina hija kkonċentrata malajr wisq jew wisq, tista 'tikkawża preċipitazzjoni tal-proteina. Il- konċentrazzjoni finali wara l- konċentrazzjoni tal- proteina m' għandhiex tkun għolja wisq; Għall-proteini li huma sensittivi għar-rata ta' konċentrazzjoni u faċli biex jiġu preċipitati, il-metodi ta' titjib suġġeriti huma kif ġej:
1) Naqqas il-veloċità ċentrifugali,
2) Uża membrana ta 'ultrafiltrazzjoni b'piż molekulari akbar
3) Daqqa u terda 'l-pajp tal-konċentrazzjoni u mbagħad iċċentrifuga
9. X'inhuma r-raġunijiet possibbli għaliex it-tubu ċentrifugu tal-ultrafiltrazzjoni ma jistax jiġi ċentrifugat?
Jekk it-tubu tal-ultrafiltrazzjoni ma jistax jiġi ċentrifugat, iċ-ċentrifugazzjoni inizjali tista 'ssir b'soluzzjoni milwiema tal-etanol ta' madwar 20%, minħabba li wara li l-membrana tal-ultrafiltrazzjoni tkun kompletament imnixxfa, il-wiċċ tal-membrana huwa idrofobiku dgħajjef, u l-fluss jista 'jiġi rrestawrat wara tixrib b'solvent ta' tensjoni tal-wiċċ baxx
10. L-użu u l-preservazzjoni xierqa ta 'tubu tal-ultrafiltrazzjoni
It-tubu tal-ultrafiltrazzjoni għandu inizjalment jiġi ċentrifugat b'ilma ppurifikat qabel l-użu biex tiġi vverifikata l-integrità tiegħu. Wara kull użu, huwa meħtieġ li tinħażen fi stat imxarrab biex tevita li l-membrana tnixxef
11. Kif tneħħi l-endotossina mit-tubu tal-ultrafiltrazzjoni?
It-tubu tal-ultrafiltrazzjoni pprovdut minna ma ġiex ittrattat bl-endotossin. Fl-istess ħin, minħabba l-eżistenza mifruxa ta 'endotossini fin-natura, kampjuni li jeħtieġu tossini interni jistgħu jitnaddfu minn qabel b'idrossidu tas-sodju 0.5N qabel l-esperiment, u mbagħad jitnaddfu bl-ilma RO biex ineħħu ħafna mill-endotossina
12. Meta l-proteina kkonċentrata tiġi analizzata 'l isfel, jinstab li hemm interferenza. X'inhi r-raġuni?
It-tubu tal-ultrafiltrazzjoni jista 'jitnaddaf minn qabel b'buffer jew ilma ppurifikat. Jekk l-interferenza għadha teżisti, naddafha bl-idrossidu tas-sodju 0.1N, u mbagħad naddafha b'ilma ppurifikat
13. Jista' jkun hemm assorbiment mhux speċifiku bejn il-proteina fil-mira u l-membrana tal-ultrafiltrazzjoni fil-proċess ta' konċentrazzjoni. Kif ittejjebha?
Aħna nużaw membrana idrofilika tal-polyethersulfone, iżda għal xi proteini bi proprjetajiet speċjali, l-assorbiment mhux speċifiku tagħhom mal-membrana jista 'jissaħħaħ. F'dan il-każ, nistgħu nippruvaw nittrataw minn qabel it-tubu tal-ultrafiltrazzjoni qabel l-esperiment, jew nikkuntattjaw lill-inġinier tagħna
14. Wara l-konċentrazzjoni, jinstab li m'hemm l-ebda proteina fil-mira fil-konċentrat. X'inhuma r-raġunijiet possibbli?
1) Il-konċentrazzjoni inizjali ta 'proteina m'għandhiex tkun baxxa wisq. Jekk il-konċentrazzjoni tkun baxxa wisq, il-membrana ma tistax tinżamm
2) Agħżel id-daqs xieraq tal-pori tal-membrana. Iċ-ċentrifugazzjoni u l-konċentrazzjoni ta 'tubu ultrafiltrazzjoni jappartjenu għal filtrazzjoni mejta tat-tarf. Id-daqs tal-pori tal-membrana huwa ġeneralment inqas minn darbtejn jew aktar tal-proteina fil-mira
3) Agħżel veloċità ċentrifugali xierqa
4) Jekk il-proteina fil-mira tippreċipiċix
